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產(chǎn)品中心

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間充質(zhì)干細(xì)胞無血清培養(yǎng)基

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產(chǎn)品特點(diǎn)

適用于原代細(xì)胞分離及傳代培養(yǎng)

兼容多種間充質(zhì)干細(xì)胞,臍帶、脂肪、骨髓等

無血清,無任何動物源組分,不含抗生素,性能穩(wěn)定,批間差異小

化學(xué)成分明確,批間高度一致性

高細(xì)胞擴(kuò)增率,單個代次

詳細(xì)介紹

 適用于原代細(xì)胞分離及傳代培養(yǎng)

 兼容多種間充質(zhì)干細(xì)胞,臍帶、脂肪、等

 無血清,無任何動物源組分,不含抗生素,性能穩(wěn)定,批間差異小

 化學(xué)成分明確,批間高度一致性

 高細(xì)胞擴(kuò)增率,單個代次擴(kuò)增倍數(shù)達(dá)20倍以上

 單個T175收獲細(xì)胞>2E7,單個十層細(xì)胞工廠收獲8-10億

 細(xì)胞直徑14-15μm,小于市場同類型產(chǎn)品

 GMP level,注射用水配制,內(nèi)毒素<0.1EU/ml

 自主化研發(fā)與生產(chǎn)體系,供貨穩(wěn)定,性價比高

產(chǎn)品介紹

  • 可用于多種來源的間充質(zhì)干細(xì)胞的原代細(xì)胞分離及傳代培養(yǎng),如:臍帶(hUCMSCs)、脂肪(hADSCs)等, 并保持細(xì)胞多向分化的潛能。

  • 無血清,無任何動物源組分,不含抗生素,性能穩(wěn)定,批間差異小。

  • 高細(xì)胞擴(kuò)增率,相同代次細(xì)胞數(shù)量遠(yuǎn)高于市場上同類型產(chǎn)品。

  • 自主化研發(fā)與生產(chǎn)體系,供貨穩(wěn)定,性價比高。

  • 支持臨床級 / 藥品級細(xì)胞培養(yǎng)。

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細(xì)胞傳代時間

一般為 3 天(72h)左右。不同 hMSC 生長速度有差異,推薦以細(xì)胞匯合度選擇準(zhǔn)確傳代時機(jī),細(xì)胞匯合度80-90%左右傳代,細(xì)胞匯合度過高(>95%)會影響后續(xù)細(xì)胞生長。

 

細(xì)胞形態(tài)

細(xì)胞梭形,呈旋渦狀生長。
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  • novastem-MSC體系P1-P5平均倍增次數(shù)為20.7倍。

  • 以一根臍帶為例,如分離約10g華通氏膠組織,P0代可獲得2.0E7細(xì)胞,P3代理論可獲得1.71E11的細(xì)胞。

  • 按照常規(guī)使用劑量單份5E7制備成產(chǎn)品,可制成3420份。

總結(jié)

細(xì)胞傳代時間

       一般為3天(72h)左右。不同hMSC生長速度有差異,推薦以細(xì)胞匯合度選擇準(zhǔn)確傳代時機(jī),細(xì)胞匯合度80-90%左右傳代,細(xì)胞匯合度過高(>95%)會影響后續(xù)細(xì)胞生長。培養(yǎng)基用量0.2mL/cm2。無需包被,連續(xù)培養(yǎng)3天無需換液。其他培養(yǎng)體系轉(zhuǎn)換到novastem-MSC時,初始細(xì)胞擴(kuò)增倍數(shù)可能較低。建議原培養(yǎng)基和novastem-MSC1:1混合后復(fù)蘇接種,培養(yǎng)1代后可完全轉(zhuǎn)換到novastem-MSC體系。

 

細(xì)胞傳代時間

       建議選用比較溫和的胰酶,例如Gibco TrypLE? Express酶(重組,1X),用PBS1:1稀釋,配制成胰酶工作液后使用。消化時間3-5分鐘。消化1-2分鐘后,可輕輕拍打培養(yǎng)容器,觀察到大多數(shù)細(xì)胞脫落時即可用培養(yǎng)基終止消化。

 

細(xì)胞凍存

       建議DMSO終濃度5%??梢栽诩?xì)胞消化前先配制DMSO:完全培養(yǎng)基=1:9(體積比)的凍存液,2-8℃預(yù)冷保存。待凍存細(xì)胞用完全培養(yǎng)基混勻后,緩緩加入等體積的凍存液,混勻后分裝。


質(zhì)控分析

培養(yǎng)基質(zhì)檢報告

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放行檢驗合格后,出具相應(yīng)的COA,主要檢測項目包括性狀、理化、安全性及功能性指標(biāo)。
細(xì)胞表面標(biāo)記物檢測

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培養(yǎng)的hMSCs表面標(biāo)記物檢測:

  • CD73、CD90、CD105、HLA-ABC陽性率≥95.0%。

  • CD14、CD19、CD34、CD45、HLA-DRDPDQ陽性率≤2.0%。

細(xì)胞多向分化潛能

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細(xì)胞免疫調(diào)控能力檢測
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連續(xù)培養(yǎng)的hMSCs核型檢測結(jié)果:

未發(fā)現(xiàn)染色體數(shù)目或結(jié)構(gòu)異常。

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連續(xù)培養(yǎng)的hMSCs體外成瘤性試驗結(jié)果:

hMSCs在軟瓊脂克隆法中均無法形成克隆,提示其在體外不具備成瘤性。


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